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PCR儀有哪些類型?

來源:北京康高特儀器設(shè)備有限公司 發(fā)布時間:2017-05-11 17:51:57 作者: 瀏覽次數(shù):4006次 分類:技術(shù)文章

根據(jù)DNA擴增的目的和檢測的標(biāo)準(zhǔn)可以將PCR儀分為普通PCR儀,梯度PCR儀,原位PCR,實時熒光定量PCR儀等幾類。

PCR儀
1、普通PCR儀
一般把一次PCR擴增只能運行一個特定退火溫度的PCR儀,稱之為普通PCR儀。如果要用它做不同的退火溫度則需要多次運行。主要是用作簡單的,對目的基因退火溫度的擴增。
主要應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床學(xué)、檢驗、檢疫等。

2、梯度PCR儀

一次性PCR擴增可以設(shè)臵一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因為被擴增的不同的DNA片段其*適合的退火溫度不同,通過設(shè)臵一系列的梯度退火溫度進行擴增,從而一次性PCR擴增*可以篩選出表達量高的*適合退火溫度進行有效的擴增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴增,這樣既節(jié)約時間,也節(jié)約經(jīng)費。在不設(shè)臵梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。真正的梯度,是每一排管都有*的加熱控溫探頭,2009年為止只有美國ABI公司可以做到。其他的都是從兩頭的熱傳遞來設(shè)計控溫。

梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機構(gòu)。

3、原位PCR儀

(有些品牌的PCR儀具有普通PCR、梯度PCR、原位PCR的功能,通過替換模塊進行多用途開展實驗工作) 
是用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析的細(xì)胞內(nèi)基因擴增儀。如病原基因在細(xì)胞的位臵或目的基因在細(xì)胞內(nèi)的作用位臵等。可保持細(xì)胞或組織的完整性,使PCR反應(yīng)體系滲透到組織和細(xì)胞中,在細(xì)胞的靶DNA所在的位臵進行基因擴增。不但可以檢測到靶DNA,還能標(biāo)出靶序列在細(xì)胞內(nèi)的位臵。于分子和細(xì)胞水平上研究疾病的發(fā)病機理和臨床過程及病理的轉(zhuǎn)變有著重大的實用價值。

4、實時熒光定量PCR儀(fluorescencer quantitive polymerase chain reaction, FQPCR) 

在普通PCR儀設(shè)計基礎(chǔ)上增加熒光信號激發(fā)和采集系統(tǒng)和計算機分析處理系統(tǒng),形成了具有熒光定量PCR功能的儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴增原理相同,在PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標(biāo)記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結(jié)合擴增。擴增的結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號連接輸送到計算機分析處理系統(tǒng),得出量化的實時結(jié)果輸出。 
熒光定量PCR儀有單通道,雙通道和多通道之分。當(dāng)只用一種熒光探針標(biāo)記的時候,選用單通道;有多種熒光標(biāo)記的時候使用多通道。單通道也可以檢測多熒光的標(biāo)記和目的基因表達產(chǎn)物,因為一次只能檢測一種目的基因的擴增量,需多次擴增才能檢測完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,實現(xiàn)一次檢測多種目的基因的功能。

實時熒光定量PCR儀主要應(yīng)用于臨床學(xué)檢測、生物藥研發(fā)、食品行業(yè)、科研院校等。  

實時熒光定量PCR儀+實時熒光定量試劑+通用電腦+自動分析軟件,構(gòu)成PCR-DNA/RNA實時熒光定量檢測系統(tǒng)。

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